Пирогены (pyrogen)

Пирогенами (pyrogen): называют вещества, способные вызывать лихорадку.

С химической точки зрения пирогены – липополисахариды, т.е. вещества небелковой природы, но адсорбированные на белковом носителе. Различают:

• эндогенные пирогены (клеточно-тканевые продукты)
• экзогенные пирогены (бактериального происхождения)

В производстве лекарств имеют значение именно экзогенные пирогены, источником которых являются аэробные бактерии – носители эндотоксина, а также грибы и вирусы.

Именно наличием эндотоксина определяется факт пирогенности объекта в присутствии не только самих микроорганизмов, но и их фрагментов.

• Пирогенность (pyrogenicity): Свойство химического вещества или другого агента вызывать фебрильную реакцию
• Фебрильная реакция (febrile response): температура выше нормального диапазона вследствие повышения установленной точки температуры тела

Основываясь на происхождении пирогена, фебрильный ответ можно разделить на три группы:

• пирогенность, опосредованная материалом, вызванная химическими агентами
• пирогенность, опосредованная эндотоксином
• пирогенность, опосредованная микробиальными компонентами, кроме эндотоксина.

Апирогенность – отсутствие пирогенной реакции у медицинского изделия.

Существует три метода для исследования пирогенности:

• Испытание на бактериальные эндотоксины (BET)
• Исследования пирогенности на иммунных клетках человека (HCPT)
• Исследование пирогенности на кроликах

Исследование пирогенности на кроликах in vivo
является единственным, в отличие от других двух методов, измеряющим фебрильный ответ в организме в качестве конечной точки в соответствии с определением пирогена.

Пирогены – термостабильные вещества, они разрушаются только при нагревании в суховоздушных стерилизаторах при температуре 250°С в течение 30 минут.

• При воздействии пара под давлением (t 120°С автоклавированием) в растворах пирогены разрушаются только через 5 часов.
• Следовательно, освободиться от пирогенных веществ в воде и жидких имплантируемых медицинских изделиях при помощи термической стерилизации практически невозможно

Таким образом, каждое медицинское изделие после его правильной стерилизации стерильно, но не каждое стерильное медицинское изделие – апирогенно.

По фармакопейной методике (ГФ ГФ XIV) пирогенность медицинских изделий определяется с помощью биологического метода:

• основанного на изменении температуры тела кролика после введения испытуемого раствора, полученного в результате экстракции исследуемого изделия (готовят на 0,9%-ном растворе хлорида натрия).
• Экстракт вводят трем кроликам, в ушную вену из расчета 10 мл на 1 кг веса кролика.
• Температуру тела измеряют дважды перед проведением испытания и после внутривенного введения каждые 30 мин в течение 3 часов.

Медицинское изделие считают апирогенным, если:

• если сумма индивидуальных максимальных повышений температур для трех кроликов не превышает 1,2 °С
• а индивидуальное повышение температуры ни у одного из трех кроликов не превышает 0,5 ºС.

Стерильность и апирогенность – разные понятия и подменять одно другим – нельзя.

Испытаниям на пирогенность подлежат медицинские изделия:

• в отношении которых требования к апирогенности установлены нормативными документами
• или производителем (на маркировке, в технической документации, в эксплуатационной документации).

Нормативная документация

Евразийский экономический союз:

• В п. 6.23 Рекомендации Коллегии ЕЭК от 8.10.2019 № 29 О методических рекомендациях по содержанию и структуре документов регистрационного досье медицинского изделия указано требование описывать свойства пирогенности медицинского изделия в составе регистрационного досье.
• В соответствии с Таблицей 2, п. 27 Рекомендаций Коллегии ЕЭК от 21.05.2019 № 14 «О методических рекомендациях по проведению экспертизы безопасности, качества и эффективности МИ» в целях их регистрации в рамках ЕАЭС в рекомендациях по структуре отчета о клиническом доказательстве и эффективности МИ указываются классификационные признаки МИ (а именно – пирогенное или апирогенное).
• Требования к проведению испытаний на пирогенность было указано в п. 16 Решения № 38 в предыдущей редакции от 16.05.2016 г. для медицинских изделий, контактирующих с кровью человека и ее компонентами, имплантируемые, а также МИ, предназначенные для инъекционного введения, однако, в текущей редакции от 17.02.2022 г. данное требование исключено (начало действия редакции – 14.09.2022 г.)

Российская Федерация:

• Требования к исследования пирогенности отсутствуют в приказе от 30.08.2021 г. N 885н. Об утверждении порядка проведения оценки соответствия медицинских изделий в форме технических испытаний, токсикологических исследований, клинических испытаний в целях государственной регистрации медицинских изделий.

Стандарты:

• ГОСТ Р 52770-2016 Изделия медицинские. Требования безопасности. Методы санитарно-химических и токсикологических испытаний, п.5.5.2 содержит список медицинских изделий, подвергаемых испытаниям на пирогенность
• ГОСТ ISO 10991-11-2021 Изделия медицинские. Оценка биологического действия медицинских изделий. Часть 11. Исследования общетоксического действия, приложение G Пирогенность, опосредованная материалом
• ГОСТ Р ИСО 15223-1-2020 Изделия медицинские. Символы, применяемые при маркировании медицинских изделий, на этикетках и в сопроводительной документации. Часть 1. Основные требования содержит символ 5.6.3 Апирогенно

Международные стандарты:

ISO/TR 21582:2021 Pyrogenicity. В настоящий момент опубликован проект стандарта ГОСТ ISO/TR 21582-2021 Оценка биологического действия медицинских изделий. Пирогенность. Принципы и методы испытаний на пирогенность медицинских изделий.

Проект стандарта включает:

• перечень медицинских изделий, подлежащих исследованиям на пирогенность
• методики
• оборудование

Международные стандарты:

ISO/TR 21582:2021 Pyrogenicity.

Проект стандарта:

В настоящий момент разрабатывается проект стандарта ГОСТ ISO/TR 21582-2021
Оценка биологического действия медицинских изделий. Пирогенность. Принципы и методы испытаний на пирогенность медицинских изделий.

Проект стандарта включает:

• перечень медицинских изделий, подлежащих исследованиям на пирогенность
• методики
• оборудование

Автор статьи Сергей Крылов

Другие статьи Выпуск № 2. 2023 Электронное периодическое издание ПРО МЕДИЗДЕЛИЯ